第一代點擊化學在末端炔烴和疊氮化物之間的反應中使用 Cu(I) 催化劑。 盡管偶聯(lián)反應成功，但添加 Cu(I) 催化劑會對生物分子造成損害。

第二代點擊化學通過應變促進的疊氮化物-炔點擊化學利用環(huán)辛炔和疊氮化物之間的反應。 該反應不含銅，并且由于應變分子的高活化能而進行。 在這種無銅點擊化學中，常用的試劑包括 DBCO、OCT 和 BCN。 使用 BCN 等試劑可防止區(qū)域選擇性混合物的產生。

第三代點擊化學涉及四嗪和反式環(huán)辛烯 (TCO) 之間的連接，無需使用 Cu(I) 催化劑。 省略 Cu(I) 催化劑是體內細胞標記的理想選擇，同時仍能實現(xiàn)高速反應。已發(fā)現(xiàn)這允許在較低濃度下進行蛋白質修飾。將 PEG 接頭引入 Click Chemistry 試劑可增強其水溶性，使其更便于在水性緩沖液中進行生物標記。

對于點擊反應的產物純化，Clickchemistrytools提供多種介質供大家選擇。

High Capacity Streptavidin Magnetic Beads，貨號：1497.

Protein A/G Magnetic Beads，貨號：1560

Azide Magnetic Beads，貨號：1036

Methyltetrazine Magnetic Beads，貨號：1559

DBCO Magnetic Beads，貨號：1037

Alkyne Magnetic Beads，貨號：1035

Azide Agarose，貨號：1038

Picolyl Azide Agarose，貨號：1408

Agarose-GLAGLLAR-Alkyne，貨號：1582

Agarose-GLAGLLAR-Azide，貨號：1581

Alkyne Agarose，貨號：1032

DBCO Agarose，貨號：1034

Dde Azide Agarose，貨號：1139

Dde Alkyne Agarose，貨號：1140

PC Azide Agarose，貨號：1141

PC Alkyne Agarose，貨號：1142

Disulfide Azide Agarose，貨號：1238

Methyltetrazine Agarose，貨號：1199

TCO Agarose，貨號：1198