更新時(shí)間:2024-08-07
Click Chemistry Tools生產(chǎn)的鏈霉親和素磁珠具有市場(chǎng)上ZUI高的生物素結(jié)合能力之一(每毫克> 12 nmol生物素)。 更高的結(jié)合力可減少固定生物素化樣品所需的珠子質(zhì)量,并降低非特異性結(jié)合的背景噪音,從而產(chǎn)生更好的信號(hào)并降低凈成本。 珠的直徑為1.0 µm,每毫克珠至少結(jié)合12 nmol的游離生物素。 磁珠還具有出色的磁性,可使用各種磁力架快速有效地捕獲。
鏈親和素磁珠streptavidin magnetic beads
Click Chemistry Tools manufactures Streptavidin Magnetic Beads with one of the highest biotin binding capacities on the market (>12 nmol of biotin per mg). Higher binding translates into reduced bead mass required to immobilize a biotinylated sample and lower background noise from nonspecific binding, resulting in better signals and lower net costs. The beads are 1.0 µm in diameter and bind at least 12 nmol of free biotin per milligram of beads. The beads also have excellent magnetic properties for rapid and efficient capture using a variety of magnetic stands.
Click Chemistry Tools生產(chǎn)的鏈霉親和素磁珠具有市場(chǎng)上ZUI高的生物素結(jié)合能力之一(每毫克> 12 nmol生物素)。 更高的結(jié)合力可減少固定生物素化樣品所需的珠子質(zhì)量,并降低非特異性結(jié)合的背景噪音,從而產(chǎn)生更好的信號(hào)并降低凈成本。 珠的直徑為1.0 µm,每毫克珠至少結(jié)合12 nmol的游離生物素。 磁珠還具有出色的磁性,可使用各種磁力架快速有效地捕獲。
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Click chemistry tools是一家專業(yè)生產(chǎn)熒光疊氮化物探針,代謝標(biāo)記試劑;化學(xué)輔助試劑,生物素/鏈霉抗生物素蛋白的富集試劑,其產(chǎn)品遠(yuǎn)銷國(guó)內(nèi)外,歡迎咨詢。
部分產(chǎn)品的詳細(xì)列表:Click chemistry tools授權(quán)代理
鏈親和素磁珠streptavidin magnetic beads
Alkyne-PEG4-Acid | TA102-100 | 100 mg | $195 | click chemistry tools |
Cy5 NHS Ester | 1076-1 | 1 mg | $105 | click chemistry tools |
Cy7 NHS Ester | 1115-1 | 1 mg | $105 | click chemistry tools |
Click-&-Go™ Plus 405 Labeling Kit | 1313 | 1kit | $219 | click chemistry tools |
Click-&-Go™ Plus 546 Labeling Kit | 1316 | 1kit | $219 | click chemistry tools |
Click-&-Go™ Plus 647 Labeling Kit | 1320 | 1kit | $219 | click chemistry tools |
產(chǎn)品介紹:clickchemistrytools
點(diǎn)擊化學(xué)(Click chemistry)—蛋白質(zhì)組學(xué)研究和新藥研發(fā)的理想技術(shù)。美國(guó)一家小眾里生物公司,國(guó)內(nèi)通常稱呼為CCT,生產(chǎn)有濃縮介質(zhì),代謝標(biāo)記試劑,生物素標(biāo)記試劑,熒光染料以及交聯(lián)劑.
“點(diǎn)擊化學(xué)"( “click chemistry")是2001年美國(guó)諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)獲得者、史格堡研究院(Skaggs institute)化學(xué)生物研究所的研究員貝瑞夏普利斯(K. Barry Sharpless)發(fā)展出一種新技術(shù),其所具有的高效和高控制性,在化學(xué)合成領(lǐng)域掀起了一場(chǎng)風(fēng)暴,成為目前醫(yī)藥領(lǐng)域吸引人的發(fā)展方向,被業(yè)界認(rèn)為是未來(lái)加快新藥研發(fā)有效的技術(shù)之一。“點(diǎn)擊化學(xué)"的基本思想就是利用碳-雜原子成鍵反應(yīng)快速實(shí)現(xiàn)分子多樣性,一般由疊氮化物(azide)和炔烴(alkyne)作用形共價(jià)鍵,具有高效穩(wěn)定,高特異性等優(yōu)點(diǎn)。反應(yīng)不受PH影響,能在常溫條件下的水中進(jìn)行,甚至能在活細(xì)胞中進(jìn)行
原理介紹:
1.鏈霉/親和素
親和素主要包括卵白親和素、鏈親和素、卵黃親和素及類親和素等。后兩種因其特異性親和力低,研究不多,前兩種目前已深入研究并得到廣泛應(yīng)用。
親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,pI 10~10.5;在pH9~13緩沖液中性質(zhì)均穩(wěn)定,耐熱并耐多種蛋白水解酶的作用。天然親和素為堿性蛋白,由4個(gè)相同的亞單位構(gòu)成4聚體;每個(gè)親和素亞單位通過(guò)其結(jié)構(gòu)中的色氨酸殘基與生物素中的Ureido環(huán)(I環(huán))結(jié)合。因此,1個(gè)親和素分子存在4個(gè)與生物素分子結(jié)合位點(diǎn),其結(jié)合常數(shù)(Ka)高 達(dá)1015mol/L。
鏈霉親和素(SA)是與親和素(A)有類似生物學(xué)特性的一種蛋白質(zhì)。是由Streptomyces avidin菌在培養(yǎng)過(guò)程中分泌的一種蛋白質(zhì)產(chǎn)物,SA也可通過(guò)基因工程手段生產(chǎn)。SA分子量為65000,由4條序列相同的肽鏈構(gòu)成,每條SA肽鏈可以結(jié)合1個(gè)生物素分子。因此與A一樣,每個(gè)SA分子也具有4個(gè)可與生物素分子結(jié)合位點(diǎn),其結(jié)合常數(shù)與A相同為1015mol/L。約為抗原抗體間ka(105~1011 mol/L)的1萬(wàn)倍以上。
SA與A的ka雖然相同,但在實(shí)際應(yīng)用中其檢測(cè)靈敏度明顯優(yōu)于A,其原因是SA為 略偏酸性的蛋白。SA的每條肽鏈含159個(gè)氨基酸殘基,其中賴氨酸、精氨酸等堿性氨基酸的含量比一般親合素少,反之含酸性氨基酸較多,其等點(diǎn)為6.0,較A(pI=10)為低,同時(shí)在結(jié)構(gòu)中SA不含任何糖基,而A含糖可高達(dá)10%。A的高pI及高含糖結(jié)構(gòu)導(dǎo)致在聚苯乙烯板和硝酸纖維素膜上或與組織細(xì)胞DNA結(jié)合時(shí),易產(chǎn)生一定程度的非特異性結(jié)合,造成較高的顯色背景,而SA較A在應(yīng)用中明顯克服了這一缺點(diǎn)。
SA的活性可達(dá)18u,較A高(15u);與A一樣,每個(gè)SA分子也具有4個(gè)可與生物素分子結(jié)合位點(diǎn),故其效應(yīng)相同。
2.生物素
生物素(Biotin)為B族維生素之一,又稱維生素H、維生素B7、輔酶R(Coenzyme R)等。是20世紀(jì)30年代在研究酵母生長(zhǎng)因子和根瘤菌的生長(zhǎng)與呼吸促進(jìn)因子時(shí),從肝中發(fā)現(xiàn)的一種可以防治由于喂食生雞蛋蛋白誘導(dǎo)的大鼠脫毛和皮膚損傷的因子。生物素是水溶性維生素B群成員。
生物素(biotin,B)廣泛分布于動(dòng)、植物組織中,常從含量較高的卵黃和肝組織中提取,分子量244.biotin31Da.生物素分子有兩個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)(如圖),其中Ⅰ環(huán)為咪唑酮環(huán),是與親和素結(jié)合的主要部位;II環(huán)為噻吩環(huán),C2上有一戊酸側(cè)鏈,其末端羧基是結(jié)合抗體和其他生物大分子的結(jié)構(gòu),經(jīng)化學(xué)修飾后,生物素可成為帶有多種活性基團(tuán)的衍生物--活化生物素?;罨锼乜梢栽诘鞍踪|(zhì)交聯(lián)劑的介導(dǎo)下,與已知的幾乎所有生物大分子偶聯(lián),包括蛋白質(zhì),核酸,多糖,脂類等。
3.鏈親和素-生物素系統(tǒng)
生物素-親和素系統(tǒng)(Biotin-Avidin-System,BAS)是70年代末發(fā)展起來(lái)的一種新型生物反應(yīng)放大系統(tǒng)。隨著各種生物素衍生物的問(wèn)世,BAS很快被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域。近年大量研究證實(shí),生物素-親和素系統(tǒng)幾乎可與目前研究成功的各種標(biāo)記物結(jié)合。生物素與親和素之間高親合力的牢固結(jié)合以及多級(jí)放大效應(yīng),使BAS免疫標(biāo)記和有關(guān)示蹤分析更加靈敏。它已成為目前廣泛用于微量抗原、抗體定性、定量檢測(cè)及定位觀察研究的新技術(shù)。
原理示意圖
BAS在實(shí)際應(yīng)用中所具有的巨大*性,主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面。
生物素容易與蛋白質(zhì)和核酸類等生物大分子結(jié)合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質(zhì)的原有生物活性,而且比恬度高,具多價(jià)性。此外,每個(gè)親和素分子有四個(gè)生物素結(jié)合部位,可同時(shí)以多價(jià)形式結(jié)合生物素化的大分子衍生物和標(biāo)記物。因此,BAS具有多級(jí)放大作用,使其在應(yīng)用時(shí)可極大地提高檢測(cè)方法的靈敏度。
親和素與生物素間的結(jié)合具有*的親和力,其反應(yīng)呈高度專一性。因此,BAS的多層次放大作用在提高靈敏度的同時(shí),并不增加非特異性干擾。而且,BAS結(jié)合特性不會(huì)因反應(yīng)試劑的高度稀釋而受影響,使其在實(shí)際應(yīng)用中可大限度地降低反應(yīng)試劑的非特異作用。
親和素結(jié)合生物素的親和常數(shù)可為抗原-抗體反應(yīng)的百萬(wàn)倍,二者結(jié)合形成復(fù)合物的解離常數(shù)很小,呈不可逆反應(yīng)性;而且酸、堿、變性劑、蛋白溶解酶以及有機(jī)溶劑均不影響其結(jié)合。因此,BAS在實(shí)際應(yīng)用中,產(chǎn)物的穩(wěn)定性高,從而可降低操作誤差,提高測(cè)定的精確度。
生物素-親和素系統(tǒng)的多功能性還能提供一套統(tǒng)一的研究方法。例如對(duì)于某待測(cè)分子,已經(jīng)得到了對(duì)于該分子的生物素標(biāo)記抗原,那么配合結(jié)合親和素的膠體金可以在電鏡下觀測(cè),配合結(jié)合熒光標(biāo)記的親和素可以使用流式細(xì)胞儀篩選,配合連接到酶的親和素可以進(jìn)行ELISA等免疫組化實(shí)驗(yàn)。
BAS可依據(jù)具體實(shí)驗(yàn)方法要求制成多種通用性試劑(如生物素化第二抗體等)適用于不同的反應(yīng)體系,而且都可高度稀釋,用量很少,實(shí)驗(yàn)成本低;尤其是BAS與成本高昂的抗原特異性抗體偶聯(lián)使用,可使后者的用量大幅度減少,節(jié)約實(shí)驗(yàn)費(fèi)用.此外,由于生物素與親和素的結(jié)合具高速、高效的特性,盡管BAS的反應(yīng)層次較多,但所需的溫育時(shí)間不長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)往往只需數(shù)小時(shí)即可完成
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